杧果SC-SSR分子標記反應體系的建立與優化

【摘要】：采用正交設計方法,對影響PCR反應體系的5個因素(Mg2+、Taq DNA聚合酶、dNTPs、引物和模板DNA)進行了優化,建立了適用于杧果的SC-SSR-PCR反應體系。結果表明,總反應體系25μL中,包含模板DNA用量100 ng·mL-1、Mg2+濃度2.00 mmol·L-1、引物濃度0.40μmol·L-1、 Taq DNA聚合酶濃度1.00 U、 dNTPs濃度0.15 mmol·L-1。利用優化的杧果SC-SSR-PCR反應體系對10對SC-SSR引物進行驗證,均能擴增出清晰、明亮、特異的電泳條帶。因此,優化的杧果SC-SSR-PCR反應體系適用于杧果種質鑒定和親緣關系分析。